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牛肉片中(飼料)的粗蛋白含量檢測方案

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【概述】

凱氏法測定樣品中的含氮量,即在催化劑作用下,用硫酸破壞有機物,使含氮物轉化成硫酸銨。加入強堿進行蒸餾使氨逸出,用硼酸吸收后,再用酸滴定,測出氮含量,將結果乘以換算系數6.25,計算出粗蛋白含量。

【實驗/操作方法】


1.樣品的消化

稱取樣品0.5~1g(含氮量5~80mg)準確至0.0002g,放入消化管中,加入5g混合催化劑,與樣品混合均勻,再加入10ml硫酸,將消化管置于消化爐上加熱,直至呈透明的藍綠色,然后在繼續加熱,至少30分鐘。

2.SKD-20S2消化爐 

操作(6個樣品和2個空白)

按”SET”鍵+“A/M”鍵3秒,跳出第二設置區程序參數修改界面。連續按“SET”鍵數次出來

檢查“RUN”=“3”,pro= “ 1 ”  ,再設置r1 =200,T1=5分鐘,c1=180度,r2=180,T2=10,C2=250度,r3=180, T3=5, C3=350度,r4=200,T4=90,c4=410,r5=0,T5=0,C5=0度。。。。r32=0,t32=0,c32=0,設置好后等幾秒鐘,程序會自動保存。

再打開啟動開關(綠開關)-----------程序自動運行,自動結束。如果出現不運行,再檢查“RUN”設置為“3”,pro= “ 1 ”  。

3.SKD-1000全自動定氮儀

樣品消化好后,冷卻至室溫。

蒸餾設置:堿45ml,稀釋液40ml,標準酸0.0911(mo/l),蒸餾功率一百%,蒸餾時間6分鐘,硼酸儀器自動加。

【實驗結果/結論】

氮含量計算公式

重復性計算公式

【儀器/耗材清單】

耗材


1)硫酸:化學純,含量為98%,無氮。

2)混合催化劑:1g硫酸銅,9g硫酸鉀,均為化學純,磨碎混勻。

3)氫氧化鈉:化學純,40%水溶液(m/v)。5%水溶液(m/v)

4)硼酸:化學純,2%水溶液(m/v)。

5)混合指示劑:甲基紅0.1%乙醇溶液,溴甲酚綠0.5%乙醇溶液,兩溶液等體積混合,在陰涼處保存期為三個月。

6)鹽酸標準溶液:c(HC1)=0.1mol/L。9ml鹽酸(分析純),注入1000ml蒸餾水中。

7)硼酸吸收液:2%硼酸溶液(20 g/L):稱取100 g 硼酸,加水溶解后并稀釋至5000 mL。加入(1:3.5混合指示劑6ML)搖勻,再加入5%的氫氧化鈉稀釋溶液0.35ML搖勻,顏色呈紫紅色。

儀器

1)實驗室用樣品粉碎劑或研缽

2)分析天平:感量0.0001g

3)消化爐(SKD-20S2)

4)容量瓶100ml

5)滴定管:10、25ml

6)消化管:300ml

7)定氮儀(SKD-1000)



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